HE染色技术

常规（HE）染色技术

    常规染色或HE（Haematoxylin and eosin）染色。它是病理技术中最常用的一种方法，通过它可以做出病理诊断和发现寻求别的辅助方法，以达到准确，完整的病理诊断。

一、病理染色

病理学的所有切片，都必须通过一种以上的染料，通过各种不同的方法，将切片中各种不同的物质，在不同染液的作用下，将其显示出来，使之在光学显微镜下，能够完全的观看各种结构。例如，HE染色，好质量的切片可以清晰地显示出许多不同的结构，细胞核着蓝黑色，细胞浆着粉红色，软骨着蓝色等。清晰的结构为诊断提供可靠的依据，因此，染色技术也是病理技术中的重要组成部分，必须不断地总结，方能提高。如果染色不好，切片染色一团糟，红蓝不分，结构不清，层次不明，影响了镜下的观察，直接影响了临床诊断，染色结果的好坏直接关系到诊断的准确性。

二、染色方法及步骤

1、脱水透明：

由低浓度到高浓度酒精作脱水剂，逐渐脱去组织块中的水份。再将组织块置于既溶于酒精，又溶于石蜡的透明剂二甲苯中透明，以二甲苯替换出组织块的中酒精。

2、浸蜡包埋：

将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中，放入溶蜡箱保温。待石蜡完全浸入组织块后进行包埋：先制备好容器，倒入已溶化的石蜡，迅速夹取已浸透石蜡的组织块放入其中。冷却凝固成块。

3、切片与贴片：

将包埋好的蜡块固定于切片机上，切成薄片， 5—8微米厚。切下的薄片放到加热的水中烫平，再贴到载玻片上，放45℃恒温箱中烘干。

4、人工苏木素，伊红染色法（HE法）
(1)切片浸入二甲苯中5-10min；
(2)切片浸入二甲苯中5-10min；
(3)100%酒精1min。
(4)100%酒精1min。
(5)95%酒精1min。
(6)95%酒精1min。
(7)90%酒精1min。
(8)80%酒精1min。
(9)自来水洗1min。
(10)浸入苏木素染液浸染10-15min。
(11)自来水洗30second-1min。
(12)1%盐酸酒精分化30second。
(13)流水冲洗15min以上。
(14)1%伊红酒精染3-5min。
(15)90%或95%酒精分化30sec。
(16)95%酒精30sec-1min。
(17)95%酒精30sec-1min。
(18)95%酒精30sec-1min。
(19)100%酒精1min。
(20)100%酒精1-2min。
(21)碳酸二甲苯1min。
(22)二甲苯1-2min。
(23)二甲苯1-2min
(24)二甲苯1-2min。
(25)中性树胶封固。

一、结果提供

细胞核被染成深蓝黑色；细胞浆被染成粉红色；软骨及钙盐被染成蓝色；胶原纤维染成淡粉红色，嗜酸性细胞及嗜酸性颗粒呈鲜红色；弹力纤维呈淡粉红色；某些蛋白性物呈粉红色等。

1、完整的实验报告（包含试剂、耗材、操作步骤、病理结果）；

2、原始病理照片，一般提供100倍、400倍照片各2张；

3、如果客户提供的是组织，我们提供石蜡块、染色片

四、样本要求：

取材保持组织新鲜（组织块以小于2cm*1.5cm*0.3cm为宜），立即放入固定液（固定液用10%福尔马林液或4%多聚甲醛缓冲液，体积为组织块的10倍以上）中，避免干燥，4°冰箱保存

结果展示